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技術知識
納豆芽孢桿菌固體發(fā)酵研究進展
帥明等為優(yōu)化納豆芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基,采用微生物固態(tài)發(fā)酵技術,以固態(tài)發(fā)酵后的活菌數(shù)、芽孢數(shù)、蛋白酶及α-淀粉酶活力為指標,對納豆芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基組成及配比,添加碳源、氮源種類及濃度,培養(yǎng)基的含水量進行優(yōu)化研究。試驗結果表明,在玉米粉與麥麩配比 3∶7、葡萄糖 2%、硝酸銨 0.5%、水60%條件下發(fā)酵效果最好,得到的芽孢平均數(shù)為1.0×109CFU/g。
金燕飛等報道了以豆粕為原料,在固體發(fā)酵條件下納豆菌的生長曲線;豆粕的浸水量、浸泡水酸堿度、NaC1添加量、碳氮源對菌生長的影響;發(fā)酵豆粕干燥加工時載體玉米粉的添加量,低溫干燥和高溫處理對活茵數(shù)的影響。結果表明,發(fā)酵16 h 時納豆菌生長達到高峰期 ;當豆粕中加pH6.5的浸泡水使含水量達60%,添加N aC1 0.30%、葡萄糖5%、明膠5%時,較為適 宜納豆菌生長。產(chǎn)品干燥加工中,發(fā)酵豆粕與玉米粉的適宜配比為1:1,65℃下加溫處理 60min以內(nèi)對產(chǎn)品中活菌數(shù)影響不顯著。75℃以上的高溫處理 ,會導致活菌數(shù)明顯下降。中試成品干粉的活茵總數(shù) ≥1.5×109 cfu/g 。
蔡凱凱通過單因素試驗優(yōu)化得到納豆芽孢桿菌最佳固體培養(yǎng)基配比為:米糠水解殘渣、葡萄糖2.0%、硝酸銨0.5%、含水量60%;最佳培養(yǎng)條件為:溫度35℃、接種量8%、時間5d。在此培養(yǎng)基和條件下發(fā)酵后,納豆芽孢桿菌活菌數(shù)為4.05×1010cfu/g、芽孢數(shù)為1.81×1010cfu/g。通過對不同保護劑的單因素試驗,選擇了脫脂奶粉、抗壞血酸和麥芽糊精作為復合保護劑的成分,再經(jīng)過L9(34)正交試驗的優(yōu)化,確定了凍干保護劑的組成為:脫脂奶粉15.0%、抗壞血酸0.3%、麥芽糊精5.0%。在此保護劑條件下,納豆菌存活率可達71.57%,凍干粉納豆菌活菌數(shù)可達8.23×109cfu/g、芽孢數(shù)可達5.62×109cfu/g。產(chǎn)品在室溫、-18℃和4℃下保藏60d,均能保持較好的穩(wěn)定性;固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)品經(jīng)真空干燥后,納豆芽孢桿菌活菌數(shù)為6.33×1010cfu/g、芽孢數(shù)為2.61×1010cfu/g、蛋白酶活力為4352u/g。產(chǎn)品在室溫、-18℃和4℃下保藏30d,均能保持較好的穩(wěn)定性。