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技術(shù)知識(shí)
微生物平板菌落檢測(cè)中 CFU是什么單位?
CFU(Colony-Forming Units) "菌落形成單位"指單位體積中的細(xì)菌、霉菌、酵母等微生物的群落總數(shù)。在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí),由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖所形成的集落,稱為菌落形成單位,以其表達(dá)活菌的數(shù)量。菌落形成單位的計(jì)量方式與一般的計(jì)數(shù)方式不同,一般直接在顯微鏡下計(jì)算菌體數(shù)量會(huì)將活與死的菌體全部算入,但是CFU只計(jì)算活的菌體數(shù)量。
菌落的個(gè)數(shù),傳統(tǒng)上叫"個(gè)"。但是,一個(gè)菌落并不一定是一個(gè)微生物所生成,也可能是由一簇微生物(一個(gè)微生物菌團(tuán))所生成,因此叫"個(gè)"不太準(zhǔn)確,準(zhǔn)確的叫法是"菌落形成單位"。
按照CFU的概念,微生物平板菌落檢測(cè)樣品處理時(shí)對(duì)樣品的分散要求是越充分越好,盡量保證聚集成團(tuán)的菌體分散成單個(gè)菌體,這樣才能保證樣品檢測(cè)的真實(shí)性、準(zhǔn)確性。
國(guó)標(biāo)和部標(biāo)規(guī)定為了樣品充分分散,在固體樣品檢測(cè)時(shí)稱取一定的樣品加入含有吐溫80和玻璃珠的定量無(wú)菌水中,常溫?fù)u床震蕩30min后稀釋測(cè)樣
在固體發(fā)酵的芽孢桿菌樣品檢測(cè)時(shí),我們發(fā)現(xiàn)按照標(biāo)準(zhǔn)方法處理樣品,往往造成樣品檢測(cè)含量偏低。主要原因是因?yàn)檠挎邨U菌固體發(fā)酵采用糧食原料,產(chǎn)品烘干后,芽孢與殘留的淀粉、蛋白質(zhì)形成膠體團(tuán),采用常規(guī)方法處理樣品較難形成單一的芽孢。所以,在固體發(fā)酵芽孢產(chǎn)品檢測(cè)時(shí),我們對(duì)樣品處理做了改良,增加了熱水浴程序,讓芽孢、淀粉和蛋白質(zhì)膠團(tuán)充分溶解釋放,最大程度的獲得單一芽孢個(gè)體,保證產(chǎn)品檢測(cè)真實(shí)性。
具體程序如下:
固體發(fā)酵芽孢樣品稱樣→加入裝有玻璃珠的含吐溫80定量無(wú)菌水搖瓶→65℃水浴30min→搖床震蕩30min→稀釋→涂布平皿→培養(yǎng)→計(jì)數(shù)
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